DDR2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421985-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDR2O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDR2 (m) e o Plasmídeo Double Nickase DDR2 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ddr2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDR2 Anticorpo (3B11E4): sc-81707
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDR2 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421985-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDR2 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421985-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Ddr2 de camundongo codifica o receptor 2 do domínio discoidina (DDR2), uma tirosina-quinase receptora ativada por colágeno que detecta o remodelamento da matriz extracelular e transmite sinais que controlam a adesão, a migração e a proliferação celulares. A ativação de DDR2 aciona vias a jusante, incluindo a sinalização MAPK/ERK e PI3K/AKT, e pode modular a renovação da matriz por meio da regulação de metaloproteinases durante o desenvolvimento e o reparo tecidual. Em contextos estromais e mesenquimais, DDR2 contribui para respostas a microambientes ricos em colágeno que influenciam processos relacionados à fibrose e interações tumor–estroma. Alterações na sinalização de DDR2 têm sido associadas à desregulação da homeostase da matriz extracelular e ao remodelamento patológico em múltiplos modelos de doença, sustentando sua relevância em estudos mecanísticos.
DDR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ddr2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ddr2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ddr2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ddr2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.