DDR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400414-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDR2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDR2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDR2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDR2 Anticorpo (3B11E4): sc-81707
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400414-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDR2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400414-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O receptor do domínio discoidina 2 (DDR2) é uma tirosina-quinase receptora ativada por colágeno que conecta a detecção da matriz extracelular à sinalização intracelular que controla a adesão, migração e proliferação celulares, bem como a remodelação da matriz. Ao se ligar a colágenos fibrilares, o DDR2 sofre autofosforilação e ativa vias como MAPK/ERK, PI3K–AKT, a sinalização da família SRC e reguladores do citoesqueleto, influenciando transições epitélio–mesênquima e interações com o estroma. A atividade do DDR2 está intimamente ligada à homeostase do tecido conjuntivo e ao turnover do colágeno, e alterações na sinalização do DDR2 têm sido associadas à remodelação relacionada à fibrose e à dinâmica do microambiente tumoral. Como alvo humano de DDR2, ele é frequentemente estudado em modelos de sinalização dirigida pela matriz extracelular, comportamento invasivo e cross-talk entre tirosina-quinases receptoras.
DDR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.