DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416011
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDI1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DDI1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-416011 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DDI1 (homólogo 1 induzível por dano ao DNA) codifica uma proteína evolutivamente conservada implicada na proteostase e nas respostas ao estresse, com homologia a domínios do tipo ubiquitina e de protease retroviral. Em células humanas, o DDI1 tem sido associado a processos dependentes de ubiquitina que influenciam a renovação proteica e a adaptação celular ao estresse genotóxico, dando suporte à manutenção da integridade do genoma. Por meio dessas funções, o DDI1 é estudado em vias que conectam a sinalização de dano ao DNA, o estresse associado à replicação e a degradação regulada de proteínas mal dobradas ou danificadas. A proteostase desregulada e os circuitos de resposta ao estresse são frequentemente analisados no contexto da transformação oncogênica e de fenótipos neurodegenerativos, tornando o DDI1 um alvo útil para pesquisa mecanística.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDI1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DDI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DDI1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DDI1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDI1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DDI1 para a investigação da sinalização de DDI1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DDI1 críticos para a função DDI1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DDI1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DDI1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DDI1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DDI1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DDI1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DDI1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DDI1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.