DDC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403811-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDC (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403811-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403811-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDC codifica a descarboxilase de L-aminoácidos aromáticos (AADC), uma enzima dependente de fosfato de piridoxal que catalisa a descarboxilação da L-DOPA em dopamina e do 5-hidroxitriptofano em serotonina. Por meio dessas reações, a DDC atua em um ponto de ramificação crucial da biossíntese de neurotransmissores monoaminérgicos e influencia redes de sinalização a jusante que regulam a excitabilidade neuronal, o controle motor, vias relacionadas ao humor e a comunicação neuroendócrina. A atividade da DDC se intersecciona com o metabolismo da tirosina e do triptofano, a homeostase presináptica de neurotransmissores e o manejo vesicular de monoaminas, conectando o fluxo metabólico à função sináptica. A desregulação da expressão da DDC ou de sua atividade enzimática é relevante para estudos de perturbações nas vias dopaminérgica e serotoninérgica, fenótipos neurodesenvolvimentais e relacionados ao movimento, e mecanismos mais amplos de acoplamento entre metabolismo e neurotransmissores.
DDC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.