DCTD Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405193-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DCTDO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DCTD (h) e o Plasmídeo Double Nickase DCTD (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DCTD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DCTD Anticorpo (F-9): sc-376659
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DCTD Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405193-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DCTD Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405193-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DCTD humano codifica a deaminase de desoxicitidilato, uma enzima citosólica que catalisa a desaminação de dCMP em dUMP, fornecendo uma fonte essencial de dUMP para a biossíntese de timidilato e mantendo pools equilibrados de desoxinucleotídeos. Por seu papel no metabolismo de pirimidinas, o DCTD sustenta a replicação e o reparo do DNA ao influenciar a disponibilidade de dTTP e limitar o estresse replicativo. A perturbação da homeostase de nucleotídeos é uma característica comum de células em rápida proliferação e frequentemente está associada à instabilidade genômica na biologia do câncer. Assim, o DCTD serve como um nó molecular útil para estudar o controle metabólico da síntese de DNA, a progressão do ciclo celular e respostas ao estresse induzidas por desequilíbrio de nucleotídeos.
DCTD O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DCTD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DCTD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DCTD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DCTD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.