DC-SIGN Double Nickaseプラスミド (h): sc-401368-NIC

CD209はDC-SIGN（CD209）をコードしており、これは主に樹状細胞および一部のマクロファージ集団に発現するC型レクチン受容体で、微生物や内因性リガンド上の高マンノース型およびフコシル化グリカンに結合します。DC-SIGNは、カルシウム依存的な糖鎖認識と、関連アダプターを介したシグナル伝達を通じて、抗原の取り込みやエンドサイトーシスを調節し、さらにNF-κBやRaf-1依存性シグナル伝達などの下流経路を制御して、サイトカイン応答やT細胞プライミングの形成に影響を与えます。この受容体は粘膜組織および末梢組織における病原体認識と免疫調節に寄与し、ICAMファミリー分子との相互作用を介して白血球のトラフィッキングや細胞間接着にも影響します。DC-SIGNの活性や発現の変化は、感染に対する感受性の違いや炎症性免疫表現型の差異と関連づけられており、CD209は機序解明を目的とした免疫学研究において重要な標的となっています。

DC-SIGN ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CD209 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CD209内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CD209の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CD209が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。