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DAGLβ慢病毒激活颗粒(h) | sc-406084-LAC | 200 µl | $455.00 |
二酰甘油脂肪酶β(DAGLβ)由人类 DAGLB 基因编码,是一种丝氨酸水解酶,可将二酰甘油转化为 2-花生四烯酰甘油(2-AG),而 2-AG 是主要的内源性大麻素脂质信使。通过调控 2-AG 的可用性,DAGLβ 会影响大麻素受体信号传导、脂质第二信使的动态变化,以及与免疫细胞激活和炎性介质产生相关的下游通路。DAGLβ 的活性还与花生四烯酸和类二十烷酸(eicosanoid)网络相互交织,使其成为脂质代谢与炎症串扰的调控因子。与 DAGLβ 相关的内源性大麻素与脂质信号失衡,已在神经炎症、代谢功能障碍以及免疫相关疾病机制等背景中受到研究。
DAGLβ 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 DAGLB 表达。
DAGLβ 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在DAGLB转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性DAGLβ表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 DAGLB 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。