DAGLα Lentiviral Activation Particles (h): sc-402826-LAC

ジアシルグリセロールリパーゼα（DAGLA；DAGLα）は膜結合性のセリン加水分解酵素で、ジアシルグリセロールを主要なエンドカンナビノイド脂質メッセンジャーである2-アラキドノイルグリセロール（2‑AG）へと変換する反応を触媒します。2‑AGの利用可能性を制御することで、DAGLαは逆行性シナプス伝達やその下流のカンナビノイド受容体経路の形成に寄与し、神経細胞の興奮性およびシナプス可塑性に影響を与えます。さらにDAGLA活性は、ホスホリパーゼCによって生成されるジアシルグリセロールを、より広範な炎症・代謝プログラムへと結びつける脂質シグナル伝達ネットワークとも連動しています。エンドカンナビノイドトーンの破綻やDAGLAに関連する脂質シグナルは、神経発達・精神神経系の表現型に加え、疼痛や神経炎症過程との関連で研究されており、機序解明研究における重要性が示されています。

DAGLα レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なDAGLAの発現上昇を可能にします。

DAGLα レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、DAGLA転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性DAGLαの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のDAGLAゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。