DABP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405222-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DABPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DABP (h) e o Plasmídeo Double Nickase DABP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DBP. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DABP Anticorpo (H-6): sc-390146
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DABP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405222-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DABP Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405222-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DBP codifica a proteína ligante do promotor da albumina no sítio D (DABP), um fator de transcrição PAR bZIP que se liga a elementos D-box para coordenar programas transcricionais circadianos. Em células humanas, a DABP participa da regulação, controlada pelo relógio, de redes gênicas ligadas ao metabolismo e à desintoxicação e se integra a osciladores transcricionais por meio de interações com reguladores circadianos centrais. Ritmos dependentes de DBP influenciam a expressão gênica hepática, a sinalização hormonal e o metabolismo de xenobióticos, conectando esse fator à homeostase sistêmica. Alterações na expressão de DBP ou o desalinhamento circadiano têm sido associados à desregulação de vias metabólicas e a estados inflamatórios, o que sustenta seu uso como um ponto de entrada molecular para estudar fenótipos relacionados ao relógio em modelos relevantes para doenças.
DABP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DBP. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DBP. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DBP interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.