D2DR/Dopamine D2 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-420053

概要

Drd2はドーパミンD2受容体（D2DR）をコードしており、Gi/o共役型のGPCRとして、アデニリルシクラーゼを抑制してcAMP/PKAシグナルを低下させ、さらにイオンチャネル活性を調節することで、神経細胞の興奮性およびシナプス伝達を制御します。D2DRはMAPK/ERK経路やPI3K関連経路にも影響し、ドーパミン作動性回路においてドーパミンの放出と合成を制御する自己受容体としても機能します。マウス脳では、Drd2は線条体および皮質—辺縁系のシグナル伝達に関与し、動機づけ、報酬学習、運動制御の基盤となっています。D2DRシグナルの異常は、神経精神疾患や運動障害の病態生物学に関与すると考えられており、そのためDrd2はドーパミン作動性回路や受容体媒介性シグナル伝達の機序研究において広く用いられる標的です。

D2DR/Dopamine D2 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるDrd2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Drd2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Drd2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、D2DR/Dopamine D2 Receptorタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、D2DR/Dopamine D2 Receptorシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Drd2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• D2DR/Dopamine D2 Receptorの機能に不可欠なDrd2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Drd2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• D2DR/Dopamine D2 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびD2DR/Dopamine D2 Receptor CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Drd2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  D2DR/Dopamine D2 Receptor HDRプラスミド（m）および D2DR/Dopamine D2 Receptor HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDrd2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDrd2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。