CYP2E1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401357-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP2E1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYP2E1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYP2E1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYP2E1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP2E1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401357-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP2E1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401357-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O citocromo P450 2E1 (CYP2E1) é uma mono-oxigenase microssomal que oxida pequenos substratos orgânicos e contribui para o metabolismo de xenobióticos de fase I no retículo endoplasmático. Participa do ciclo redox e pode gerar espécies reativas de oxigénio, associando a atividade do CYP2E1 ao stress oxidativo, à peroxidação lipídica e à sinalização inflamatória a jusante. O CYP2E1 interage com vias hepáticas de desintoxicação e influencia as respostas celulares ao álcool e a exposições químicas através do metabolismo de vários compostos de baixo peso molecular. Alterações na expressão ou na atividade do CYP2E1 têm sido associadas à suscetibilidade a lesão hepática induzida por tóxicos e a fenótipos de stress metabólico, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos do processamento de xenobióticos.
CYP2E1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP2E1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP2E1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP2E1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP2E1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.