Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CYP27B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401155-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP27B1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYP27B1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYP27B1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYP27B1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CYP27B1 Anticorpo (G-5): sc-515903
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP27B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401155-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP27B1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401155-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP27B1 codifica a 25-hidroxivitamina D-1α-hidroxilase mitocondrial, a enzima-chave que converte 25-hidroxivitamina D no hormônio ativo 1,25-di-hidroxivitamina D (calcitriol). Ao controlar a abundância de calcitriol, o CYP27B1 regula programas de sinalização do receptor de vitamina D (VDR) que influenciam a homeostase de cálcio e fosfato, a mineralização óssea e amplas redes transcricionais em células imunes e epiteliais. Sua atividade conecta o metabolismo de esteróis à sinalização endócrina e a processos redox mitocondriais, com efeitos downstream sobre diferenciação, o tônus inflamatório e a biologia de barreira. A expressão ou a função desregulada de CYP27B1 está associada a distúrbios do metabolismo da vitamina D e tem sido estudada em contextos que incluem fenótipos esqueléticos, suscetibilidade autoimune, inflamação crônica e sinalização alterada no microambiente tumoral.
CYP27B1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP27B1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP27B1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP27B1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP27B1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.