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CYP1A2双切口酶质粒(h) | sc-401178-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP1A2双切口酶质粒(h2) | sc-401178-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP1A2 编码一种肝脏细胞色素 P450 单加氧酶,催化内源性化合物以及多种外源性物质(包括咖啡因和其他芳香族底物)的氧化代谢。作为药物Ⅰ相代谢的一部分,CYP1A2 通过生成更具极性的代谢产物和反应性中间体来影响生物活化与清除途径,这些中间体可进一步影响氧化应激与细胞氧化还原稳态。其表达受外源物感知型转录调控程序调节,尤其与芳烃受体(AHR)信号通路密切相关,从而将环境暴露与代谢重编程联系起来。CYP1A2 功能及其调控的个体差异已被广泛研究,因为它会影响药代动力学表型、化学物质易感性以及与代谢相关的肝脏生物学过程。
CYP1A2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CYP1A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYP1A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CYP1A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CYP1A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。