CYP19 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400604-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP19O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYP19 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYP19 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYP19A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CYP19 Anticorpo (E-9): sc-374176
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP19 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400604-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP19 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400604-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP19A1 codifica a aromatase (CYP19), uma enzima microssomal do citocromo P450 que catalisa a etapa final da biossíntese de estrogênios ao converter andrógenos em estrogênios. Essa atividade é central para o metabolismo de hormônios esteroides e para a sinalização endócrina, moldando programas transcricionais por meio das vias do receptor de estrogênio e influenciando a homeostase do desenvolvimento e específica de tecidos. A expressão de CYP19A1 é rigidamente regulada em contextos gonadais, do tecido adiposo, ósseos e cerebrais, conectando a produção local de estrogênio à proliferação celular, diferenciação e regulação metabólica. A atividade desregulada da aromatase tem sido associada a fisiopatologias dependentes de hormônios, incluindo alterações no balanço estrogênio/andrógeno e sinalização aberrante na biologia reprodutiva e mamária.
CYP19 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP19A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP19A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP19A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP19A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.