CYP11A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401269-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYP11A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYP11A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYP11A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYP11A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYP11A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401269-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP11A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401269-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP11A1 codifica a enzima mitocondrial do citocromo P450 responsável pela clivagem da cadeia lateral (P450scc), que catalisa a conversão do colesterol em pregnenolona, a primeira etapa e a etapa limitante da velocidade na biossíntese de hormônios esteroides. Essa reação inicia a produção de glicocorticoides, mineralocorticoides e esteroides sexuais e se integra às vias mitocondriais de transporte de colesterol e de parceiros redox envolvendo ferredoxina e ferredoxina redutase. A atividade de CYP11A1 é central para os programas esteroidogênicos no córtex adrenal e nos tecidos gonadais, conectando-se à homeostase endócrina e aos estados de diferenciação celular. Alterações na expressão ou na função de CYP11A1 estão associadas a distúrbios congênitos da biossíntese de esteroides, a fenótipos de insuficiência adrenal e à desregulação da sinalização esteroidogênica estudada em modelos de doenças reprodutivas e adrenais.
CYP11A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYP11A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYP11A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYP11A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYP11A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.