Cyclophilin 40 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426720
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Cyclophilin 40 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Cyclophilin 40, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Cyclophilin 40 Anticuerpo (C-11): sc-137216
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Cyclophilin 40 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426720 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ppid codifica la ciclofilina 40 (Cyp40), una isomerasa peptidil‑prolil cis–trans que actúa como cocochaperona con dominio TPR dentro de complejos HSP90/HSP70. Al facilitar la maduración conformacional y el ensamblaje de proteínas cliente, Cyp40 influye en la proteostasis, la señalización de receptores esteroideos y las vías de respuesta al estrés vinculadas al plegamiento proteico y al control de calidad. Ppid también se ha asociado con la regulación del manejo de proteínas mitocondriales y la susceptibilidad a la apoptosis mediante mecanismos dependientes de chaperonas. La desregulación de las redes chaperona–inmunofilina se estudia con frecuencia en contextos de neurodegeneración, inflamación y estrés del proteoma asociado al cáncer, lo que convierte a Ppid en un nodo útil para la investigación mecanística en sistemas murinos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Cyclophilin 40 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ppid en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ppid junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ppid tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Cyclophilin 40.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ppid para la investigación de la señalización de Cyclophilin 40, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ppid críticos para la función de Cyclophilin 40
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ppid para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Cyclophilin 40 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Cyclophilin 40 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ppid. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Cyclophilin 40 (m) y el plásmido HDR Cyclophilin 40 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ppid para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ppid definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.