cyclin G1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402045
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cyclin G1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cyclin G1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cyclin G1 Anticorpo (F-5): sc-8016
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cyclin G1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402045 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CCNG1 codifica a ciclina G1, uma ciclina atípica que é rapidamente induzida por estresse celular e integra sinais da rede do p53 para modular a progressão do ciclo celular e o controle de checkpoints. A ciclina G1 participa da regulação por retroalimentação da atividade do p53 por meio de complexos associados a fosfatases, influenciando decisões dependentes de fosforilação nas respostas a danos no DNA. Por meio dessas funções, ela impacta a proliferação, a estabilidade genômica e programas de sinalização relacionados à apoptose. A expressão desregulada de CCNG1 ou a dependência do contexto da via do p53 tem sido observada em múltiplos tipos de câncer, tornando-o um nó útil para estudar respostas ao estresse oncogênico e a aptidão de células tumorais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cyclin G1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCNG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCNG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCNG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cyclin G1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCNG1 para a investigação da sinalização de cyclin G1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCNG1 críticos para a função cyclin G1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCNG1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cyclin G1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo cyclin G1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCNG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cyclin G1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR cyclin G1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCNG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCNG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.