cyclin G1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402045

概要

CCNG1はサイクリンG1をコードしており、サイクリンG1は細胞ストレスによって迅速に誘導される非典型的なサイクリンです。p53ネットワークからのシグナルを統合し、細胞周期の進行やチェックポイント制御を調節します。サイクリンG1は、ホスファターゼ関連複合体を介したフィードバック制御によりp53活性の調節にも関与し、DNA損傷応答におけるリン酸化依存的な意思決定に影響を与えます。これらの機能を通じて、増殖、ゲノム安定性、ならびにアポトーシス関連のシグナルプログラムに影響を及ぼします。CCNG1発現の異常や、p53経路の文脈依存性は複数のがん種で観察されており、がん原性ストレス応答や腫瘍細胞の適応度を研究するうえで有用な標的（ノード）となります。

cyclin G1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCCNG1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CCNG1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CCNG1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、cyclin G1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、cyclin G1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CCNG1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• cyclin G1の機能に不可欠なCCNG1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CCNG1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• cyclin G1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびcyclin G1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CCNG1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  cyclin G1 HDRプラスミド（h）および cyclin G1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCCNG1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCCNG1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。