Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) cyclin D1: sc-400047-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)cyclin D1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa cyclin D1 (h) y el plásmido de doble nickasa cyclin D1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CCND1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: cyclin D1 Anticuerpo (A-12): sc-8396
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) cyclin D1 | sc-400047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) cyclin D1 | sc-400047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCND1 codifica la ciclina D1, un regulador central de la transición G1/S del ciclo celular que se asocia con CDK4/6 para fosforilar RB1 y promover la transcripción dependiente de E2F. La ciclina D1 integra señales mitogénicas de vías como RAS–MAPK y PI3K–AKT para acoplar señales extracelulares con la entrada al ciclo celular, la proliferación y la diferenciación. La desregulación de la expresión de CCND1 o el aumento del número de copias se asocian con frecuencia con un control anómalo de los puntos de control, programas transcripcionales alterados e inestabilidad genómica en múltiples contextos tumorales, lo que la convierte en un nodo ampliamente estudiado en redes de señalización del ciclo celular y oncogénicas.
cyclin D1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CCND1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CCND1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CCND1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CCND1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.