CYB5R3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404764-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CYB5R3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CYB5R3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CYB5R3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYB5R3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CYB5R3 Anticorpo (G-11): sc-398043
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CYB5R3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404764-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYB5R3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404764-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYB5R3 codifica a citocromo b5 redutase 3, uma flavoproteína dependente de NADH que transfere eletrões para o citocromo b5 e outros aceitadores, dando suporte ao metabolismo do heme e dos lípidos. Contribui para a homeostase redox celular e influencia vias como a dessaturação/elongação de ácidos gordos, a biossíntese do colesterol e a proteção contra o stress oxidativo, através da manutenção de cofatores na forma reduzida. A atividade da CYB5R3 também está associada à redução da meta-hemoglobina nos eritrócitos e a uma regulação mais ampla dos processos de transferência de eletrões nas mitocôndrias e no retículo endoplasmático. A perturbação genética ou funcional de CYB5R3 tem sido associada à meta-hemoglobinemia e a fenótipos relacionados com desequilíbrio redox, tornando-a relevante para o estudo de défices de transferência de eletrões e de respostas ao stress metabólico.
CYB5R3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYB5R3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYB5R3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYB5R3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYB5R3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.