CXX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406246

概要

FAM127Aはヒトタンパク質CXX1をコードしており、核内プロセスや細胞状態の制御に関与すると示唆されているものの、十分に特徴づけられていない因子です。得られている証拠から、CXX1はクロマチン関連機能や転写制御に関与し、増殖、ストレス応答、分化プログラムに影響を与える経路と結び付いている可能性があります。FAM127Aの発現変化は、複数の疾患コンテキストにおけるゲノム／トランスクリプトームデータセットで報告されており、遺伝子制御機構や細胞のフィットネス表現型を調べる研究標的としての有用性を支持しています。

CXX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるFAM127A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、FAM127A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、FAM127Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CXX1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CXX1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、FAM127A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CXX1の機能に不可欠なFAM127Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、FAM127Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CXX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCXX1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、FAM127A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CXX1 HDRプラスミド（h）および CXX1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはFAM127Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のFAM127A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。