CUG-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403267

概要

CELF2（CUG-BP2）はCELFファミリーに属するRNA結合タンパク質で、選択的スプライシング、mRNAの安定性、翻訳を多様な転写産物にわたって制御することで、転写後の遺伝子発現制御を統合的に調節します。細胞分化やストレス応答の過程で、シグナル入力とRNAプロセシングを連動させる役割を担い、細胞骨格の構築、細胞周期制御、アポトーシスに関わるネットワークに影響を及ぼします。CELF2依存的なRNAプログラムは、組織特異的な転写産物アイソフォームの選択に寄与し、免疫細胞の活性化や発生過程における遺伝子制御の文脈でしばしば研究されています。CELF2活性の制御異常は、神経筋疾患やがん関連モデルで観察されるスプライシング環境の変化と関連づけられており、そのRNA標的や制御パートナーの作用機序解明に向けた研究が進められています。

CUG-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCELF2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CELF2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CELF2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CUG-BP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CUG-BP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CELF2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CUG-BP2の機能に不可欠なCELF2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CELF2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CUG-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCUG-BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CELF2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CUG-BP2 HDRプラスミド（h）および CUG-BP2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCELF2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCELF2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。