CTMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429205
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CTMP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CTMP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CTMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429205 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Them4 codifica a CTMP (proteína moduladora carboxi-terminal), um regulador associado à membrana mais conhecido por modular a sinalização de AKT/PKB. A CTMP pode ligar-se à AKT e influenciar o seu estado de fosforilação, ligando a Them4 ao controlo, pela via PI3K–AKT, da sobrevivência celular, do metabolismo e das respostas ao stress. Em sistemas murinos, a atividade alterada da CTMP tem sido associada a alterações na função mitocondrial, no controlo do stress oxidativo e em processos relacionados com a apoptose. Como a sinalização PI3K–AKT está amplamente implicada em fenótipos inflamatórios, metabólicos e neurodegenerativos, Them4 é frequentemente estudado como um nó que liga a dinâmica de sinalização a estados celulares relevantes para a doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CTMP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Them4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Them4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Them4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CTMP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Them4 para a investigação da sinalização de CTMP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Them4 críticos para a função CTMP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Them4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CTMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CTMP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Them4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CTMP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CTMP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Them4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Them4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.