CTDSPL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-435953

Visão geral

Ctdspl2 codifica a CTDSPL2, uma pequena proteína do tipo fosfatase de domínio C-terminal, implicada na regulação de vias de sinalização dependentes de fosforilação e de programas transcricionais. Os membros dessa família de fosfatases estão associados ao controle da dinâmica de desfosforilação do CTD da RNA polimerase II e a circuitos fosforregulatórios mais amplos que influenciam a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a manutenção da identidade celular. Em sistemas murinos, a CTDSPL2 é utilizada como um ponto de partida mecanístico para estudar como comutadores mediados por fosfatases se integram ao controle transcricional e a processos associados à cromatina. A regulação alterada de fosfatases do CTD e de nós de sinalização relacionados é relevante em modelos de proliferação aberrante e desregulação de linhagem, sustentando sua investigação em contextos de pesquisa voltados para oncologia e desenvolvimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CTDSPL2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ctdspl2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ctdspl2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ctdspl2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CTDSPL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ctdspl2 para a investigação da sinalização de CTDSPL2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ctdspl2 críticos para a função CTDSPL2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ctdspl2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CTDSPL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CTDSPL2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ctdspl2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CTDSPL2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CTDSPL2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ctdspl2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ctdspl2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.