Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CTCF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401245-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CTCFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CTCF (h) e o Plasmídeo Double Nickase CTCF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CTCF. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CTCF Anticorpo (G-8): sc-271474
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CTCF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401245-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CTCF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401245-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTCF codifica o fator de ligação CCCTC, uma proteína multifuncional de ligação ao DNA com dedos de zinco que organiza a arquitetura 3D do genoma ao estabelecer fronteiras de cromatina e regular a comunicação entre enhancers e promotores. Ele coopera com a coesina para formar e manter domínios de associação topológica (TADs), influenciando o controle transcricional, o tempo de replicação e as respostas a danos no DNA. Por meio de isolamento e looping de longa distância, o CTCF modula programas de expressão gênica específicos de linhagem e a manutenção do estado epigenético. Alterações na função do CTCF ou na paisagem de suas ligações estão associadas à organização desregulada da cromatina observada em distúrbios do desenvolvimento e em diversos tipos de câncer, tornando-o um alvo amplamente utilizado para estudar a regulação gênica ligada à topologia do genoma.
CTCF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CTCF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CTCF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CTCF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CTCF interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.