CRP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406188

概要

CSRP1は、システインおよびグリシンに富むタンパク質1（CRP1）をコードしています。CRP1はLIMドメインを有するアクチン結合因子で、細胞の形態や運動性に関連する細胞骨格の組織化および転写プログラムを調節します。CRP1はアクチンストレスファイバーのダイナミクスや、フォーカルアドヒージョンに関連するシグナル伝達に関与し、平滑筋分化や、より広範な間葉系細胞の挙動の協調に寄与します。接着依存性経路や遺伝子制御ネットワークに影響を及ぼすことから、CSRP1は組織リモデリングや細胞浸潤といった文脈でしばしば研究されています。CSRP1の発現変動は、がんや線維化疾患など複数の疾患状況で報告されており、細胞骨格制御や分化状態の変化が主要な実験テーマとなっています。

CRP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCSRP1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、CSRP1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、CSRP1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CRP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CRP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、CSRP1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CRP1の機能に不可欠なCSRP1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、CSRP1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CRP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCRP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、CSRP1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CRP1 HDRプラスミド（h）および CRP1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCSRP1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCSRP1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。