CRISP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417129
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CRISP-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CRISP-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CRISP-3 Anticorpo (D-6): sc-377505
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CRISP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-417129 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CRISP3 codifica a proteína secretória rica em cisteína 3 (CRISP-3), um membro secretado da superfamília CAP, enriquecido em tecidos exócrinos e em compartimentos relacionados ao sistema imune, como os grânulos de neutrófilos. A CRISP-3 está implicada em interações extracelulares proteína–proteína que influenciam respostas imunes inatas, a secreção epitelial e a sinalização regulada por proteases em microambientes teciduais. Alterações na expressão de CRISP3 foram relatadas em condições associadas à inflamação e em múltiplos contextos de câncer, sustentando seu uso como um gene ligado a biomarcadores em estudos de biologia tumoral e de comunicação entre sistema imune e epitélio. Em modelos celulares, a perturbação de CRISP-3 é comumente utilizada para investigar programas de secreção, vias responsivas ao estresse e remodelamento do microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CRISP-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CRISP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CRISP3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CRISP3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CRISP-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CRISP3 para a investigação da sinalização de CRISP-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CRISP3 críticos para a função CRISP-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CRISP3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CRISP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CRISP-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CRISP3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CRISP-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CRISP-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CRISP3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CRISP3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.