CRISP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419035
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CRISP-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CRISP-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CRISP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419035 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Crisp1 codifica a proteína secretória rica em cisteína 1 (CRISP-1), um membro da superfamília CAP (proteínas secretórias ricas em cisteína/antígeno 5/proteína relacionada à patogênese 1), altamente expresso no trato reprodutor masculino e secretado para o lúmen do epidídimo. Em camundongos, a CRISP-1 associa-se aos espermatozoides durante a maturação epididimária e contribui para as interações entre gametas, incluindo a regulação da capacitação espermática e a participação na ligação do espermatozoide à zona pelúcida e em eventos relacionados à fertilização. Em nível celular, a CRISP-1 está ligada à biologia da via secretória e a interações com proteínas extracelulares que modulam as propriedades de membrana e de sinalização dos espermatozoides. A desregulação de Crisp1 é relevante para estudos de fenótipos de fertilidade masculina e da função do trato reprodutor, e também é utilizada como modelo para investigar os papéis de proteínas da família CAP em contextos mucosos e relacionados ao sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CRISP-1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Crisp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Crisp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Crisp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CRISP-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Crisp1 para a investigação da sinalização de CRISP-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Crisp1 críticos para a função CRISP-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Crisp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CRISP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CRISP-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Crisp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CRISP-1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CRISP-1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Crisp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Crisp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.