Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CPTII Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403401-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPTIIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CPTII (h) e o Plasmídeo Double Nickase CPTII (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CPT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CPTII Anticorpo (G-5): sc-377294
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPTII Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403401-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPTII Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403401-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A carnitina palmitoiltransferase 2 (CPT2) codifica a CPTII, uma enzima da membrana interna mitocondrial que catalisa a reconversão de acilcarnitinas de cadeia longa em acil-CoAs, permitindo sua entrada na β-oxidação. Essa etapa é central para o catabolismo de ácidos graxos, para a integração do acetil-CoA derivado de lipídios no ciclo do TCA e para a manutenção da homeostase energética celular em tecidos com alta demanda metabólica. A atividade da CPTII influencia o balanço redox mitocondrial e o fluxo lipídico, conectando-a a vias mais amplas que regulam o metabolismo oxidativo e as respostas ao estresse metabólico. Variantes patogênicas de CPT2 estão associadas a distúrbios da oxidação de ácidos graxos de cadeia longa, tornando a CPTII um alvo-chave para estudos mecanísticos do metabolismo energético, da função mitocondrial e de fenótipos celulares induzidos por lipídios.
CPTII O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CPT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CPT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CPT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CPT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.