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CPT1-C双切口酶质粒(h) | sc-402510-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPT1-C双切口酶质粒(h2) | sc-402510-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
肉碱棕榈酰转移酶 1C(CPT1C)编码 CPT1-C,这是一种在脑组织中富集、与线粒体相关的同源酶。其主要作用被认为是调控长链脂肪酸的处理与脂质感知过程,而非参与经典的 β-氧化通量。CPT1-C 与神经元能量稳态、线粒体功能以及对营养可用性的适应性反应相关,这些过程与脂肪酸代谢及细胞应激通路相互交织。多种肿瘤背景及神经系统疾病模型中均有 CPT1C 表达改变的报道,因此有必要研究脂质代谢重编程与线粒体调控如何影响细胞存活、信号传导与分化。由此,CPT1-C 常被用于研究其在人类细胞中对代谢适应、氧化还原平衡以及与生长相关的生物能量学的贡献。
CPT1-C 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CPT1C 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CPT1C内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CPT1C的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CPT1C基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。