CPSF6 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404919-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPSF6O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CPSF6 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CPSF6 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CPSF6. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CPSF6 Anticorpo (F-3): sc-376228
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPSF6 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404919-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPSF6 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404919-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CPSF6 (fator 6 de especificidade de clivagem e poliadenilação) é um componente central do complexo CFIm que ajuda a definir o processamento da extremidade 3′ de pré-mRNAs ao regular a escolha do sítio de poli(A) e a poliadenilação alternativa. Por meio do acoplamento entre clivagem/poliadenilação, transcrição e splicing, o CPSF6 contribui para a maturação do mRNA, a estabilidade dos transcritos e programas de expressão gênica que moldam o estado celular. O CPSF6 também se relaciona com processos de ligação ao RNA e exportação nuclear e tem sido implicado em interações hospedeiro–patógeno, incluindo a entrada nuclear do HIV-1 e o direcionamento de sítios de integração. A desregulação do processamento da extremidade 3′ e da poliadenilação alternativa associada à função do CPSF6 está ligada à alteração de sinalização oncogênica e à remodelação do transcriptoma relevante para doenças em diversos tipos de células humanas.
CPSF6 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CPSF6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CPSF6. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CPSF6. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CPSF6 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.