Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CPS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402014-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CPS1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CPS1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CPS1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CPS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CPS1 Anticorpo (B-1): sc-376190
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CPS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402014-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CPS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402014-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A carbamoil-fosfato sintase 1 (CPS1) codifica a enzima mitocondrial que catalisa a etapa limitante da velocidade do ciclo da ureia, convertendo amônia e bicarbonato em carbamoil-fosfato em uma reação dependente de ATP. Ao controlar a eliminação do nitrogênio e a biossíntese de arginina, a CPS1 conecta o metabolismo mitocondrial aos processos de desintoxicação hepatocelular e a redes metabólicas mais amplas de aminoácidos e nucleotídeos. Alterações na atividade da CPS1 estão associadas à hiperamonemia e a distúrbios do ciclo da ureia, e sua expressão pode ser remodelada em doenças metabólicas e no câncer para sustentar mudanças no manejo do nitrogênio. Essas propriedades tornam a CPS1 um alvo relevante para investigar o fluxo mitocondrial de nitrogênio, a regulação do ciclo da ureia e a reprogramação metabólica em modelos celulares humanos.
CPS1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CPS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CPS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CPS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CPS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.