Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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connexin 43 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400241-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- connexin 43O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase connexin 43 (h) e o Plasmídeo Double Nickase connexin 43 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GJA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:connexin 43 Anticorpo (F-7): sc-271837
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
connexin 43 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400241-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
connexin 43 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400241-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **GJA1** codifica a conexina 43 (Cx43), uma importante proteína de junções comunicantes (gap junctions) que se organiza em conexons hexaméricos para formar canais intercelulares, permitindo a troca direta de íons e pequenos metabólitos. Por meio da comunicação intercelular via junções comunicantes, a Cx43 regula o acoplamento elétrico, a sinalização de cálcio, a homeostase tecidual e respostas coordenadas ao estresse, com papéis de destaque na condução cardíaca, no reparo de feridas e na padronização do desenvolvimento. A conexina 43 é controlada de forma dinâmica por tráfego e turnover dependentes de fosforilação, conectando-se a vias que envolvem PKC, MAPK/ERK e remodelamento do citoesqueleto. Alterações na expressão de **GJA1** ou na função do canal têm sido associadas a fenótipos arritmogênicos, reparo tecidual prejudicado e mudanças relacionadas ao câncer na comunicação célula–célula e na invasão.
connexin 43 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GJA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GJA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GJA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GJA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.