COL4A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419744
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL4A2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico COL4A2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL4A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419744 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Col4a2 codifica a cadeia α2 do colágeno tipo IV (COL4A2), um componente estrutural central das membranas basais que forma uma rede heterotrimérica com outras cadeias de colágeno IV para sustentar a arquitetura dos tecidos. Esse arcabouço da matriz extracelular regula a adesão, a migração e a polaridade celulares e modula a comunicação de sinalização com integrinas e vias de fatores de crescimento envolvidas na estabilidade vascular e no desenvolvimento de órgãos. Alterações na função de COL4A2 estão associadas à fragilidade da membrana basal e a patologias de pequenos vasos, tornando-o relevante para estudos de integridade cerebrovascular, desenvolvimento ocular e barreiras de filtração renal. Em modelos murinos, Col4a2 oferece um ponto de entrada viável para dissecar mecanismos guiados pela matriz que influenciam o comportamento de células endoteliais e epiteliais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COL4A2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Col4a2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Col4a2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Col4a2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COL4A2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Col4a2 para a investigação da sinalização de COL4A2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Col4a2 críticos para a função COL4A2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Col4a2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo COL4A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo COL4A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Col4a2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo COL4A2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR COL4A2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Col4a2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Col4a2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.