Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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COL12A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402361
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL12A1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico COL12A1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COL12A1 Anticorpo (A-11): sc-166020
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL12A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402361 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
COL12A1 codifica a cadeia alfa 1 do colágeno tipo XII, um colágeno associado a fibrilas com hélices triplas interrompidas (FACIT) que se localiza na matriz extracelular e se associa às fibrilas de colágeno tipo I. Ao conectar colágenos fibrilares a outros componentes da matriz, COL12A1 contribui para a resistência à tração dos tecidos, a mecanotransdução e a organização da matriz pericelular, influenciando a adesão e a migração celular. Sua função está intimamente ligada a vias de remodelamento da matriz extracelular e à sinalização mediada por integrinas, que moldam a arquitetura do estroma durante o desenvolvimento e o reparo. Alterações na expressão de COL12A1 ou variantes têm sido implicadas em fenótipos hereditários do tecido conjuntivo e disfunção musculoesquelética, tornando-o um alvo útil para o estudo de mecanismos de doença impulsionados pela matriz.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COL12A1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COL12A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COL12A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COL12A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COL12A1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COL12A1 para a investigação da sinalização de COL12A1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COL12A1 críticos para a função COL12A1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COL12A1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo COL12A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo COL12A1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COL12A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo COL12A1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR COL12A1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COL12A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COL12A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.