COL11A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406243

Visão geral

COL11A2 codifica a cadeia α2 do colágeno tipo XI, um colágeno fibrilar quantitativamente pouco abundante, mas estruturalmente importante, que se integra ao colágeno tipo II para regular o diâmetro das fibrilas de colágeno e a organização da matriz extracelular, particularmente na cartilagem. Sua expressão sustenta a diferenciação de condrócitos, a biomecânica tecidual e a montagem da matriz durante o desenvolvimento esquelético, influenciando processos como a fibrilogênese do colágeno e a formação da matriz pericelular. Alterações em COL11A2 têm sido associadas a displasias esqueléticas hereditárias e à perda auditiva neurossensorial, refletindo seus papéis na integridade da cartilagem e na arquitetura da matriz extracelular do ouvido interno. Como gene de matriz, COL11A2 também é utilizado para estudar a sinalização dependente de MEC e as interações célula–matriz que modulam o fenótipo celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO COL11A2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene COL11A2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do COL11A2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do COL11A2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína COL11A2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de COL11A2 para a investigação da sinalização de COL11A2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) COL11A2 críticos para a função COL11A2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos COL11A2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo COL11A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo COL11A2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus COL11A2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo COL11A2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR COL11A2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia COL11A2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo COL11A2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.