COL10A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401960-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL10A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COL10A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COL10A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COL10A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL10A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401960-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL10A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401960-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL10A1 codifica o colagénio tipo X alfa 1, um colagénio de cadeia curta produzido seletivamente por condrócitos hipertróficos e incorporado na matriz extracelular da cartilagem durante a ossificação endocondral. Ao moldar a composição e a mineralização da matriz, o COL10A1 contribui para a maturação da placa de crescimento, para os programas de diferenciação dos condrócitos e para a sinalização matriz extracelular–recetor, que interage com vias como TGF-β/BMP e a mecanotransdução mediada por integrinas. A desregulação da expressão ou da função de COL10A1 está associada a um desenvolvimento esquelético anómalo e tem sido relatada como um marcador de hipertrofia e remodelação cartilaginosa aberrantes em contextos de doenças musculoesqueléticas. Além disso, os padrões de expressão de COL10A1 são usados para investigar estados de cartilagem hipertrófica em modelos de biologia do desenvolvimento e de engenharia de tecidos.
COL10A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COL10A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COL10A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COL10A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COL10A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.