COG4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-416653

概要

COG4は、ゴルジ体の構造を維持し、ゴルジスタック内における逆行性小胞輸送を調整する保存性の高いオリゴマー型ゴルジ（COG）テザリング複合体の中核サブユニットをコードします。小胞のドッキングおよびSNARE依存的な融合を制御することで、COG4は糖鎖付加酵素のリサイクルと、エンドメンブレン系全体にわたる分泌タンパク質・膜タンパク質の適切なプロセシングを支えます。COG複合体の機能が破綻すると、ゴルジ体から小胞体（ER）への輸送やゴルジ内輸送が乱れ、その結果、タンパク質の糖鎖修飾が変化し、分泌、受容体の成熟、膜組成に広範な影響が生じます。COG4や関連するCOG構成因子の変異は先天性糖鎖付加異常症や神経発達系の表現型と関連しており、本遺伝子はゴルジ輸送の異常に結びつく疾患メカニズムを研究する上で重要です。

COG4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるCOG4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、COG4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、COG4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、COG4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、COG4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、COG4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• COG4の機能に不可欠なCOG4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、COG4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• COG4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCOG4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、COG4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  COG4 HDRプラスミド（h）および COG4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCOG4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCOG4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。