CNBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419712

概要

Cnbpは細胞性核酸結合タンパク質（cellular nucleic acid binding protein：CNBP）をコードしており、一本鎖DNAおよびRNAに結合して転写と翻訳を制御する、保存性の高いジンクフィンガータンパク質です。CNBPは核酸代謝に関与し、細胞増殖、ストレス応答、免疫関連シグナル伝達に結び付く遺伝子発現プログラムの制御に関与します。また、Gリッチな配列要素の制御や、サイトカイン発現および細胞分化に影響する経路の調節に関与することが示唆されています。CNBP機能の変化は、神経筋および炎症性の表現型に関連する遺伝子発現の異常状態と関連しており、マウスモデルにおける機序解明研究の有用な標的（ノード）となります。

CNBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCnbp遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cnbp内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cnbpのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CNBPタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CNBPシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cnbp欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CNBPの機能に不可欠なCnbpエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cnbpゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CNBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCNBP CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cnbp遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CNBP HDRプラスミド（m）および CNBP HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCnbpホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCnbp標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。