Clusterin CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419695

概要

Mouse Clu はクラスターリン（clusterin）をコードする。クラスターリンは分泌性で細胞外マトリックスに関連する糖タンパク質であり、分子シャペロンおよび脂質結合因子として機能し、プロテオスタシス、補体系の制御、細胞残骸の除去に関与する。クラスターリンは、アポトーシスの調節、酸化ストレスへの適応、膜リモデリングなどのストレス応答過程にも関与し、炎症や細胞外恒常性を制御する経路との関連も示されている。神経系を含むさまざまな組織において、CLU はタンパク質凝集ダイナミクスやグリア／免疫シグナル伝達における役割の観点から頻繁に研究されている。CLU の発現や機能の破綻は、神経変性、代謝ストレス、腫瘍生物学と関連づけられており、組織障害や慢性炎症状態の機序研究における有用なターゲットとなる。

Clusterin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるClu遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Clu内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cluのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Clusterinタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Clusterinシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Clu欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Clusterinの機能に不可欠なCluエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cluゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Clusterin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびClusterin CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Clu遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Clusterin HDRプラスミド（m）および Clusterin HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCluホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のClu標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。