CLEC-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417520

Visão geral

CLEC3A codifica a CLEC-3A, uma proteína secretada contendo um domínio de lectina do tipo C, implicada na organização da matriz extracelular e na comunicação célula–matriz. A CLEC-3A tem sido associada à modulação de interações com colágeno e a processos de remodelação tecidual que se cruzam com sinalização de adesão, migração e do microambiente inflamatório. Em tecidos humanos, foi relatada alteração da expressão de CLEC3A em contextos de fibrose, reparo de feridas e estroma associado a tumores, apoiando seu uso como marcador e como nó mecanístico em fenótipos impulsionados por remodelação. Essas propriedades tornam a CLEC3A relevante para estudar como proteínas do tipo lectina moldam sinais extracelulares que influenciam o comportamento epitélio–mesenquimal e o tráfego de células imunes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CLEC-3A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CLEC3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CLEC3A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CLEC3A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CLEC-3A.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CLEC3A para a investigação da sinalização de CLEC-3A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CLEC3A críticos para a função CLEC-3A
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CLEC3A para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CLEC-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CLEC-3A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CLEC3A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CLEC-3A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CLEC-3A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CLEC3A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CLEC3A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.