CLCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402998-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CLCA1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CLCA1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CLCA1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CLCA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CLCA1 Anticorpo (E-4): sc-271156
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CLCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CLCA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CLCA1 (acessório do canal de cloreto 1) codifica uma glicoproteína secretada e associada à membrana que modula a condutância de cloreto em epitélios e a fisiologia do muco, particularmente na mucosa gastrointestinal e das vias aéreas. Está comumente associado à diferenciação de células caliciformes e à regulação da produção de mucinas, integrando-se a programas inflamatórios e de remodelamento epitelial que moldam a função de barreira. Alterações na expressão de CLCA1 foram observadas em estados inflamatórios da mucosa e em neoplasias epiteliais, nas quais é frequentemente utilizado como marcador do estado de diferenciação e de mudanças na composição das linhagens secretoras. Essas propriedades tornam o CLCA1 um alvo útil para o estudo da regulação do transporte iônico epitelial, da homeostase do muco e de redes transcricionais associadas à inflamação.
CLCA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CLCA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CLCA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CLCA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CLCA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.