CLC-1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405071

개요

CLCN1은 골격근 전압개폐성 염화물 채널인 CLC-1을 암호화하며, 높은 기저 염화물 전도도를 제공함으로써 막 재분극과 전기적 안정성을 결정하는 핵심 인자입니다. CLC-1은 반복적인 활동전위 발화를 제한하고 흥분성을 조절하여 정상적인 흥분–수축 연결과 근섬유 항상성을 유지하는 데 기여합니다. CLCN1의 활성은 전압, 세포내 염화물, 그리고 채널 게이팅을 변화시키는 신호전달 입력에 의해 조절되며, 이로써 이온 수송 생리와 대사 상태와의 연관성이 형성됩니다. CLCN1의 병적 변이 또는 조절 이상은 근육 이완 장애를 특징으로 하는 근긴장증(myotonia) 및 관련 신경근 표현형과 강하게 연관됩니다.

CLC-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CLCN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CLCN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CLCN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CLC-1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CLC-1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CLCN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CLC-1 기능에 중요한 CLCN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CLCN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CLC-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 CLC-1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CLCN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CLC-1 HDR 플라스미드 (h) 및 CLC-1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CLCN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CLCN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.