CKR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419708
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CKR-7 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CKR-7, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CKR-7 Anticorpo (ELC-Fc): sc-23936
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CKR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419708 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccr7 codifica o receptor de quimiocina CKR-7 (CCR7), um GPCR que se liga a CCL19 e CCL21 para orientar a quimiotaxia e fornecer sinais posicionais a células T, células B e células dendríticas. A sinalização de CCR7 ativa vias dependentes de Gαi que influenciam a remodelação da actina, a ativação de integrinas e a sinalização MAPK/PI3K, sustentando o tráfego de leucócitos através do endotélio linfático e de órgãos linfoides secundários. Em camundongos, Ccr7 é fundamental para a vigilância imunológica, a organização do tecido linfoide e a migração regulada de células imunes durante a inflamação. O tráfego dependente de CCR7, quando desregulado, é frequentemente estudado em modelos de autoimunidade, inflamação crônica e microambientes imunes tumorais, nos quais alterações no homing celular podem moldar a progressão da doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CKR-7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccr7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccr7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccr7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CKR-7.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccr7 para a investigação da sinalização de CKR-7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccr7 críticos para a função CKR-7
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccr7 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CKR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CKR-7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccr7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CKR-7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CKR-7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccr7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccr7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.