Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CIN85 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402573-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CIN85O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CIN85 (h) e o Plasmídeo Double Nickase CIN85 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SH3KBP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CIN85 Anticorpo (A-7): sc-166862
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CIN85 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402573-NIC | 20 µg | $410.00 |
SH3KBP1 codifica a CIN85, uma proteína de andaime (scaffold) multiadaptadora que coordena o tráfego endocítico e a atenuação de sinais ao montar complexos a jusante de receptores tirosina-quinase, incluindo o EGFR, por meio de interações com ligases de ubiquitina Cbl e com a maquinaria endocítica. Por meio de seus domínios SH3 e de interfaces de ligação ricas em prolina, a CIN85 regula a internalização de receptores, a ubiquitinação e o direcionamento para lisossomos, modulando a amplitude e a duração da sinalização MAPK e PI3K-AKT. A CIN85 também contribui para a remodelagem do citoesqueleto, a formação de invadopódios e a dinâmica de vesículas, processos associados à migração celular e a fenótipos invasivos em múltiplos contextos de doença. Vias associadas à CIN85 desreguladas têm sido estudadas em relação à sinalização oncogênica, à renovação de receptores imunológicos e a alterações no tráfego de membranas.
CIN85 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SH3KBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SH3KBP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SH3KBP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SH3KBP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.