CIITA Lentiviral Activation Particles (m2): sc-419390-LAC-2

マウスのCiitaは、クラスII主要組織適合遺伝子複合体（MHCクラスII）トランスアクチベーター（CIITA）をコードしており、CIITAはDNAに直接結合しないマスター制御因子として、RFX、NF-Y、およびCREB/ATFからなるエンハンソソームとの相互作用を介して、MHCクラスII遺伝子ならびに抗原提示に関わる補助因子の転写を協調的に制御する。CIITAの活性は、プロフェッショナル抗原提示細胞における誘導性の抗原提示を規定し、IFN-γなどのサイトカインシグナルによって刺激され得ることから、自然免疫からのシグナルを適応免疫のCD4+T細胞応答へと結び付ける。Ciita/CIITA機能の破綻は、MHCクラスII発現の変化や、感染、自己免疫、腫瘍免疫監視に関連する免疫表現型と関連することがマウスモデルで示されている。Ciitaの遺伝子編集やCIITAに焦点を当てた摂動研究は、抗原提示経路の機構解明、免疫遺伝子転写のエピジェネティック制御、ならびに免疫学・炎症領域における機能ゲノミクススクリーニングの研究を支える。

CIITA レンチウイルス活性化粒子（m2）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なCiitaの発現上昇を可能にします。

CIITA レンチウイルス活性化粒子（m2）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Ciita転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性CIITAの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のCiitaゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。