ChREBP Lentiviral Activation Particles (h): sc-401803-LAC

MLXIPLは、糖応答性エレメント結合タンパク質（ChREBP）をコードしており、細胞内の糖質フラックスを、解糖系、de novo脂肪合成、トリグリセリド合成を制御する遺伝子プログラムへと結び付けるグルコース感知型の転写因子である。糖質代謝産物に応答して、ChREBPは核内へ移行し、糖応答性エレメントに結合して代謝酵素やトランスポーターの発現を調節し、栄養状態を肝臓および脂肪組織のエネルギー貯蔵経路と統合する。この制御軸は、インスリンシグナル伝達、AMP活性化プロテインキナーゼ（AMPK）による調節、ならびに脂質恒常性を司るより広範な転写ネットワークとも交差する。ChREBP活性の破綻は、肝脂肪化、インスリン抵抗性、心血管代謝リスクに関連する代謝表現型と関連づけられており、MLXIPLは栄養駆動性の遺伝子制御機構を解明する研究に有用なノードとなる。

ChREBP レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なMLXIPLの発現上昇を可能にします。

ChREBP レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、MLXIPL転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性ChREBPの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のMLXIPLゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。