Chr-A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400405-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Chr-AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Chr-A (h) e o Plasmídeo Double Nickase Chr-A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHGA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Chr-A Anticorpo (C-12): sc-393941
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Chr-A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400405-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Chr-A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400405-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHGA codifica a cromogranina A (Chr-A), uma proteína ácida dos grânulos secretores altamente expressa em células neuroendócrinas e armazenada juntamente com hormonas peptídicas e neurotransmissores. A Chr-A contribui para a biogénese de vesículas de núcleo denso, para a secreção regulada e para o processamento de pró-hormonas, servindo também como precursor de péptidos bioativos como a vasostatina e a catestatina, que modulam a sinalização neuroendócrina. Através das suas funções no tráfego vesicular e na exocitose acoplada ao estímulo, o CHGA está associado a vias que controlam a maturação dos grânulos secretores e a libertação dependente de cálcio. Alterações na expressão de CHGA e nos padrões de processamento de Chr-A são frequentemente usadas como indicadores moleculares em estudos de diferenciação neuroendócrina e de fenótipos secretores associados a tumores.
Chr-A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHGA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHGA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHGA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHGA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.