chordin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404997-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- chordinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase chordin (h) e o Plasmídeo Double Nickase chordin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHRD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
chordin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404997-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
chordin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404997-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CHRD humano codifica a chordin, uma glicoproteína secretada da matriz extracelular que antagoniza a sinalização de BMP ao se ligar a BMP2/4/7 e limitar o engajamento com seus receptores. Ao moldar a formação de gradientes de BMP e modular os desfechos de fosforilação de SMAD1/5/9, a chordin ajuda a controlar o padrão dorsoventral, a indução do mesoderma e a organogênese, permanecendo relevante para vias que regulam a diferenciação osteogênica e condrogênica. Alterações na atividade de CHRD podem perturbar o equilíbrio da sinalização durante o desenvolvimento e têm sido estudadas no contexto de malformações congênitas e de processos desregulados de remodelamento tecidual. Em sistemas de cultura, a perturbação de CHRD é comumente usada para investigar o crosstalk da via de BMP com a sinalização de WNT e TGF-β e para dissecar a regulação extracelular da disponibilidade de morfógenos.
chordin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHRD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHRD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHRD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHRD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.