ChoK Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403793-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ChoKO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ChoK (h) e o Plasmídeo Double Nickase ChoK (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHKA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ChoK Anticorpo (B-8): sc-376489
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ChoK Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403793-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ChoK Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403793-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHKA codifica a colina quinase alfa (ChoK), a enzima limitante da velocidade que fosforila a colina a fosfocolina na via de Kennedy para a biossíntese de fosfatidilcolina. Ao controlar os reservatórios de fosfocolina, a ChoK influencia a biogênese de membranas, a sinalização lipídica e a remodelação metabólica que sustentam a proliferação e a adaptação ao estresse. A atividade de CHKA cruza-se com programas de crescimento ligados a PI3K–AKT e MAPK por meio do metabolismo mais amplo de fosfolipídios, afetando a função de organelas e o tráfego dependente de membranas. A desregulação de CHKA e o aumento de fosfocolina têm sido associados a alterações da homeostase lipídica na biologia do câncer e em outros distúrbios caracterizados por síntese e sinalização de membranas aberrantes.
ChoK O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHKA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHKA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHKA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHKA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.