CHD7 Plasmide Double Nickase (h): sc-404017-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- CHD7 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il CHD7 Double Nickase Plasmid (h) e il CHD7 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CHD7. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: CHD7 Antibody (F-11): sc-390742
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
CHD7 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404017-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHD7 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404017-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHD7 (proteina 7 legante il DNA con elica e cromodominio) è un rimodellatore della cromatina ATP-dipendente che riconosce i segni istonici tramite i cromodomini e regola il posizionamento dei nucleosomi per controllare i programmi di espressione genica durante lo sviluppo. Partecipa alla regolazione trascrizionale e all’attività degli enhancer, interfacciandosi con vie epigenetiche che coordinano la specificazione della cresta neurale, l’organogenesi e le decisioni di destino cellulare. L’alterazione di CHD7 è associata a disturbi congeniti dello sviluppo, in particolare alla sindrome CHARGE, e un’attività di CHD7 modificata è stata studiata anche nel contesto della biologia tumorale e degli stati di differenziamento. Queste caratteristiche rendono CHD7 un bersaglio utile per analizzare la dinamica della cromatina, l’impegno di linea e le reti trascrizionali associate a malattie nelle cellule umane.
CHD7 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CHD7 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CHD7. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CHD7. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CHD7 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.